Metody pomiaru

TECHNOLOGIA PCR

Reakcja łańcuchowa polimerazy w czasie rzeczywistym (PCR, PCR w czasie rzeczywistym lub qPCR) to technika diagnostyki molekularnej służąca do identyfikacji, występującej danej próbce sekwencji genetycznej DNA lub RNA (np. genu raka, bakterii lub wirusa u ludzi, zwierząt, lub w łańcuchu dystrybucji żywności lub specyficzne cechy odmiany nasion w rolnictwie).

Technikę stosuje się do amplifikacji lub wykonania wykładniczo większej liczby kopii materiału genetycznego poprzez serię cykli ogrzewania i chłodzenia, które są następnie identyfikowane przez sprzęt laboratoryjny.

  • Jeśli wykryta zostanie amplifikacja, oznacza to, że w próbce była obecna dany bakteria, wirus lub nowotwór – wynik pozytywny.

  • Jeśli nie, oznacza to, że sekwencja docelowa nie była obecna – wynik ujemny.

PCR w czasie rzeczywistym to odmiana PCR, która pozwala na monitorowanie procesu amplifikacji w czasie rzeczywistym, a nawet może być wykorzystana do oceny ilościowej lub zliczenia ilości obecnego DNA / RNA.

PCR w czasie rzeczywistym jest jedną z najlepszych metod wykrywania bakterii lub wirusów na poziomie molekularnym, z wyższym stopniem dokładności niż mikroskopia (podglądanie przez mikroskop, aby sprawdzić, czy niektóre bakterie są obecne) i znacznie szybciej niż hodowanie kultur bakterii przez dni lub tygodnie, aby ustalić, czy ktoś ma chorobę. Takie niedokładności i opóźnienia mogą oznaczać różnicę między życiem a śmiercią. Jest to również jedyny sposób na identyfikację obecności genu, który wskazuje na predyspozycje do raka lub innych chorób.

PCR ma prawie nieskończone zastosowania, od wykrywania obecności lub nieobecności różnych patogenów w płynach ustrojowych, identyfikowania zarówno spontanicznych, jak i odziedziczonych złośliwych zmian w DNA, określania, czy miały miejsce zamierzone modyfikacje upraw, umożliwiając różnorodne testowanie nasion i wiele innych, wiele więcej.

CoPrimers™

CoPrimers ™ to wiodąca, opatentowana technologia opracowana przez Co-Diagnostics, która radykalnie poprawia wyniki molekularnych testów diagnostycznych przeprowadzanych za pomocą testów łańcuchowej reakcji polimerazy w czasie rzeczywistym („PCR”).

Unikalna, zastrzeżona struktura cząsteczek CoPrimers tworzy reakcje, które są znacznie bardziej specyficzne niż konkurencyjne technologie PCR, aby lepiej identyfikować obecność i odróżniać wirusy, patogeny, raka lub inne atrybuty w zastosowaniach rolniczych lub przemysłowych.

Prestiżowy Journal of Molecular Diagnostics uznał CoPrimers za TECHNICAL ADVANCE, ponieważ są 2,5 MILIONA razy bardziej skuteczne w zmniejszaniu błędów amplifikacji.


Proces wiązania CoPrimer ™

BEZ PRZYGOTOWANIA, OPTYMALIZACJI, PRAWDZIWE MULTIPLEKSOWANIE


1. Long Probe szybko „zakotwicza”, przybliżając Short Primer do celu DNA

2. Nici DNA fałdują się, umożliwiając wiązanie krótkiego startera CoDX ™

3. Kiedy polimeraza rozszerza się, wychwytywanie (sonda) jest rozszczepiane, uwalniając fluorofor

Jednym z najważniejszych atrybutów technologii CoPrimer Co-Diagnostics jest wirtualna eliminacja „primerów-dimerów”, głównego źródła fałszywie pozytywnych wyników testów diagnostycznych. Primer-dimery są zasadniczo wzmocnieniem błędów, które mogą wystąpić w trakcie molekularnego testu diagnostycznego. Błędy te dramatycznie minimalizują dokładność testu i prowadzą do fałszywych wyników i / lub niedokładnych diagnoz.

Ważności dokładności testu nie można przecenić, szczególnie w sytuacji diagnostyki medycznej. Umiejętność dokładnego zdiagnozowania stanu pozwoli na zastosowanie odpowiednich protokołów leczenia, które mogą mieć ogromny wpływ na jakość życia pacjenta. Niedokładne testy na raka lub choroby zakaźne mogą być opcją życia lub śmierci. Poprzez praktycznie wyeliminowanie „primerów-dimerów” z molekularnych testów diagnostycznych, CoPrimers zapewniają niezrównaną wydajność testów molekularnych PCR w czasie rzeczywistym.

Specyficzność CoPrimers umożliwia także identyfikację szerokiego spektrum warunków w pojedynczej molekularnej procedurze diagnostycznej – znanej jako multipleksowanie – w przeciwieństwie do prowadzenia odrębnych indywidualnych procedur. Multipleksowanie umożliwia jednemu testowi jednoczesną identyfikację wielu warunków, atrybutów lub sekwencji genetycznych. Multipleksowanie ma ogromny wpływ na efektywność kosztową i oszczędność czasu w badaniach molekularnych, które mogą okazać się znaczące w sytuacji medycznej oraz w środowisku produkcyjnym lub rolniczym.

Końcowy wynik CoPrimer ™

Rewolucyjne ulepszenie w trzech obszarach

123
Zwiększona
specyficzność
Wzmocniona
czułość
Mega
multipleksowanie

Zmniejszenie kosztów badań, projektowania i rozwoju o 80%



Technologia CoPrimer firmy Co-Diagnostics jest wykorzystywana w wielu projektach badawczych w USA. Technologia ta była ostatnio wykorzystywana w projekcie badawczym przeprowadzonym przez grupę Wang na Uniwersytecie Stanforda. Celem badania jest opracowanie bardziej wydajnych metod wykrywania wielu mutacji genetycznych w genie EGFR (receptor naskórkowego czynnika wzrostu), w tym najczęściej występujących mutacji w raku płuca, w ramach jednej reakcji. Badacze prowadzą badania nad tym tematem przy użyciu dostępnych w handlu starterów od kilku lat, których wyniki zostały wcześniej opublikowane, a teraz wykorzystują CoPrimers do dalszej poprawy kompleksowych metod wykrywania mutacji, o których wiadomo, że powodują raka.



Patent nr 10 093 966 “COOPERATIVE PRIMERS, PROBES, AND APPLICATIONS THEREOF” / „PODKŁADY WSPÓŁPRACUJĄCE, SONDY I ICH APLIKACJE” obejmuje metodę syntezy cząsteczki kwasu nukleinowego w strukturze opracowanej po raz pierwszy przez dr Satterfielda w 2012 r. Co-Diagnostics jest właścicielem całej własności intelektualnej, na której oparte są CoPrimers.